[基于单细胞TCRαβ双链放大配对的HLA-A*24:02受限HBsAg特异性TCR的查和功能识别]

科学领域:

• 免疫学 免疫学 免疫学
• 病毒学 病毒学
• 生物技术是生物技术.

背景情况:

• 乙型肝炎病毒 (HBV) 感染对全球健康构成重大挑战.
• 目前的抗HBV疗法存在局限性,需要新的治疗策略.
• 基于T细胞受体 (TCR) 的免疫疗法为向病毒感染提供了一个有希望的途径.

研究的目的:

• 建立一个用于查和识别B型肝炎病毒 (HBV) 特定T细胞受体 (TCRs) 的新平台.
• 探索使用已识别的HBV特异性TCRs进行抗HBV免疫治疗的新策略.
• 为了验证在识别HBV感染细胞中选择的TCRs的功能.

主要方法:

• 从急性乙型肝炎患者中分离了周围血液单核细胞.
• 使用HBsAg库刺激的CD3+CD8+CD137+T细胞的单细胞分类.
• 高通量测序用于TCRα和β链的放大,配对和lentiviral包装.
• 使用工程细胞系 (Jurkat-76-NFAT-GFP,K562表达HLA-A*24:02) 和共同培养系统对TCRs的查.
• 在健康的人类T淋巴细胞中对TCRs的功能验证.

主要成果:

• 通过使用一种新的TCRαβ配对技术,成功制备出稳定的TCR表达细胞系.
• 从21名选候选人中鉴定出9种潜在的HLA-A*24:02受限制的HBsAg特异性TCR.
• 六个HLA-A*24:02受限制的HBsAg特异性TCRs与相同的表皮图识别得到证实.
• 功能验证表明,两个选定的TCR克隆对表达HBsAg的细胞进行了特定的识别.

结论:

• 一个新的实验系统成功地识别了具有功能识别能力的受HLA-A*24:02限制的HBsAg特异性TCR.
• 这一成就为开发特定于HBV的基于TCR的抗病毒免疫疗法提供了坚实的基础.
• 开发的平台可以有效地选和识别用于针对性HBV治疗的TCR.