单分子脂质生物传感器可以缓解内源效应蛋白的抑制
Victoria L Holmes1, Morgan M C Ricci1, Claire C Weckerly1
1Department of Cell Biology, University of Pittsburgh School of Medicine, Pittsburgh, PA, USA.
The Journal of cell biology
|February 11, 2025
概括
遗传编码的脂质生物传感器可以干扰细胞信号通路,如PI3-酶 (PI3K) 和AKT激活. 使用低水平的这些生物传感器或单分子方法可以最大限度地减少这种干扰,以便进行准确的细胞动态研究.
科学领域:
- 细胞生物学 细胞生物学
- 生物化学 生物化学
- 分子成像学分子成像学
背景情况:
- 基因编码的脂质生物传感器提供实时的,空间解析的关于活细胞中的脂质动态的动态数据.
- 然而,这些生物传感器可以隔离脂质,潜在地抑制关键的细胞信号通路.
研究的目的:
- 调查过度表达的脂质生物传感器对PI 3-激酶 (PI3K) -AKT信号传递的影响.
- 探索PI3K信号动态的非侵入性探测的替代方法.
主要方法:
- 使用了PH-AKT1 PIP3/PI(3,4) P2生物传感器和内源的AKT1.1,标有NeonGreen标签.
- 检查了AKT1通过EGF介导的转移到血膜.
- 在过度表达和低水平/单分子生物传感器表达之间比较信号抑制.
主要成果:
- 过度表达的PH-AKT1生物传感器减少了EGF介导的单细胞AKT1转位,尽管有生物传感器的招募.
- 这种抑制甚至在PI{3,4) P2选择性生物传感器中也被观察到.
- 生物传感器的低水平表达,与内源性AKT水平相比,没有引起显著的抑制.
- 单分子生物传感器显示了增强的动态范围和动力学真实性.
结论:
- 脂质生物传感器的过度表达可以人工抑制PI3K-AKT信号通路.
- 低水平或单分子生物传感器表达提供了一个更准确的,非侵入性的方法来研究活细胞中PI3K信号的时空动态.
