在羊中优化CRISPR/Cas9基因编辑系统 (Ovis aries) 卵细胞通过微注射
Haitao Wang1, Hengqian Yang1,2, Tingting Li1
1State Key Laboratory of Molecular Developmental Biology, Institute of Genetics and Developmental Biology, Chinese Academy of Sciences, Beijing 100101, China.
International journal of molecular sciences
|February 13, 2025
概括
这项研究优化了羊卵细胞中的CRISPR/Cas9基因编辑,实现了畜牧养殖的高效率. 改进的方法成功生产了转基因羊,推进了分子设计育种策略.
科学领域:
- 动物遗传学 动物遗传学
- 分子生物学分子生物学
- 基因编辑技术 基因编辑技术
背景情况:
- 克里斯普尔/Cas9对于畜牧养殖至关重要,但胚芽微注射效率低于最佳.
- 在羊中优化基因编辑对于推进分子设计育种至关重要.
研究的目的:
- 评估影响羊卵细胞CRISPR/Cas9编辑效率的因素.
- 开发一种高效的方法来生产基因编辑的羊.
主要方法:
- 用CRISPR/Cas9组件微注入成熟的绵羊卵细胞.
- 优化微注射混合物的度和注射毛细血管.
- 评估环境因素对卵细胞成熟和编辑效率的影响.
主要成果:
- 试管卵子成熟效率受到环境因素的影响.
- 高效编辑SOCS2,DYA和TBXT基因,达到10 ng/μL的Cas9和sgRNA.
- 优化注射毛细管可以将卵细胞无效率降低到3.1-5.3%.
- Cas9蛋白与mRNA产生了不同的基因型;基激活对编辑没有影响.
结论:
- 为羊卵细胞建立了一个高效的CRISPR/Cas9基因编辑系统.
- 成功生成SOCS2或DYA基因编辑羊,证实了基因修饰.
- 这种方法为畜牧养殖提供了精确有效的策略.


