开发一种快速而敏感的RPA-CRISPR/Cas12a测定方法,用于非侵入性植入前遗传测试
Yuqin Liu1, Linghan Zhang1, Wenzhuo Lei1
1Department of Reproductive Medicine, The Second Affiliated Hospital of Zhengzhou University, 2nd, Jingba Road, Zhengzhou, 450053, Henan Province, China.
Analytica chimica acta
|February 13, 2025
概括
非侵入性植入前遗传检测 (PGT) 现在可以使用来自Blastocoele流体的自由DNA. 一种新的RPA-CRISPR/Cas12a测定方法可以快速准确地检测遗传疾病,特别是与性别相关的疾病.
科学领域:
- 生殖医学 生殖医学
- 分子诊断学 分子诊断学
- 遗传学 是一个遗传学.
背景情况:
- 植入前遗传检测 (PGT) 对于诊断遗传疾病至关重要.
- 侵入性PGT方法可能会影响胚胎发育,突出了对非侵入性方法的需求.
- 布拉斯托科尔液中的自由DNA为非侵入性遗传分析提供了一个有希望的来源.
研究的目的:
- 开发一种非侵入性的植入前遗传检测方法.
- 为了研究在布拉斯托科尔液中自由DNA的诊断潜力.
- 为非侵入性PGT建立一个即时诊断平台.
主要方法:
- 从65个胚胎囊中收集了布拉斯托科尔液体.
- 使用RPA-CRISPR/Cas12a技术进行遗传分析.
- 开发了一种单管双基因测定,用于TSPY1和TBC1D3基因检测.
主要成果:
- 成功构建了一个单管双基因测定,用于布拉斯托科埃尔液体.
- 通过光可视化实现了Y染色体的特定检测.
- 在1小时内获得可解释的结果,Y染色体检测准确率为95.4%.
结论:
- 布拉斯托科尔液中的自由DNA是非侵入性PGT的可行来源.
- 开发的RPA-CRISPR/Cas12a测定方法可以快速放大和检测.
- 这种测试提供了一个易于操作的,基于光的平台,用于诊断与性别有关的疾病.
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