从小鼠肺部中分离出活的髓状细胞和上皮细胞群
Daisy A Hoagland1, Ruth A Franklin2
1Department of Immunology, Harvard Medical School; Department of Stem Cell and Regenerative Biology, Harvard University.
Journal of visualized experiments : JoVE
|February 17, 2025
概括
这项研究提出了一种新的方法,用于从小鼠模型中分离各种肺细胞类型,包括免疫和非免疫细胞. 这种全面的方法增强了对肺部疾病和细胞相互作用的研究.
科学领域:
- 肺部生物学 肺部生物学
- 免疫学 免疫学 免疫学
- 细胞生物学 细胞生物学
背景情况:
- 肺部容易受到病原体和环境因素的损害.
- 鼠标模型对于了解呼吸系统疾病至关重要,但通常会单独分离免疫或上皮细胞.
- 需要同时隔离多种不同肺细胞群体来研究细胞间交声.
研究的目的:
- 描述一种用于制备来自小鼠肺部的综合单细胞悬浮液的新方案.
- 为了实现免疫和非免疫肺细胞的同时隔离,用于下游分析.
- 促进对健康和疾病中的肺生物学有更深入的了解.
主要方法:
- 支气管膜洗,然后进行肺膨胀与消毒.
- 使用自由酶混合物进行肺部的酶性消化.
- 在没有手动解离的情况下制备单细胞悬浮液,以提高细胞活力.
主要成果:
- 成功地分离了多种细胞类型,包括上皮细胞,内皮细胞,纤维细胞和髓状细胞.
- 活细胞的高产量适合流细胞计和光激活细胞分类.
- 在原始和流感感染的肺部内表皮质和髓质子集的确定的封闭策略.
结论:
- 描述的方法提供了一种全面的方法,用于从小鼠肺部分离单细胞.
- 该协议支持同时分析免疫和非免疫细胞,这对于研究肺病理生理学至关重要.
- 能够对细胞间通信和肺部疾病机制进行先进的研究.
