在Pseudomonas aeruginosa SDK-6中增强复合脂酶生成:使用OFAT和RSM进行中等优化,并进行净化和稳定性研究

科学领域:

• 生物技术和工业微生物学
• 酶工程和生物催化剂的工程.

背景情况:

• 脂酶是具有各种工业应用的关键生物催化剂.
• 有效地生产重组脂酶对于满足工业需求至关重要.

研究的目的:

• 优化生长介质成分,以增强 Pseudomonas aeruginosa SDK-6 中的重组脂酶生产.
• 描述优化的重组脂酶的特性和稳定性.

主要方法:

• 一个时间一个因素 (OFAT) 方法来识别关键介质组件.
• 响应表面方法 (RSM) 用于进一步优化介质组成.
• 二甲基硫酸盐-聚烯胺凝电泳 (SDS-PAGE) 用于分子质量测定.
• 酶活性在不同温度,pH值和添加剂的存在下进行测定.

主要成果:

• 优化产生了115.50U/mL的脂酶生产,使用0.5%的麻油,0.2%的酵母提取物和0.1%的酸,pH值为7.
• 在优化后,脂酶产量增加了3.58倍.
• 纯化脂酶的特异活性为102.73U/mg,分子质量约为19.5kDa.
• 在40°C和pH10的最佳活性;在12和40°C的性pH下,在32小时内显著稳定.
• 在各种金属离子,有机溶剂和洗剂的存在下增强活性.

结论:

• 优化的介质显著增加了Pseudomonas aeruginosa的重组脂酶的产生.
• 具有特征的脂酶对工业应用具有有利的特性,包括热和性稳定性.
• 在溶剂和金属离子的存在下酶的强度扩大了其在各种生物催化过程中的潜在用途.