研究基于二维纳米LC-MS/MS的宿主细胞蛋白:主要抗体成分的去除和保留之间的比较

科学领域:

• 生物制药学分析
• 蛋白质化学 蛋白质化学
• 分析化学 分析化学

背景情况:

• 宿主细胞蛋白 (HCP) 是重组生物制药中关键的过程相关杂质.
• 准确的医疗保健专家检测对于确保治疗单克隆抗体 (mAbs) 的安全性和有效性至关重要.
• 现有的HCP检测方法需要提高灵敏度和可靠性.

研究的目的:

• 开发一种经济和敏感的方法,用于对抗体产品进行全面的HCP评估.
• 为了比较新型六合体连接体磁珠 (HLMB) 与蛋白A对HCP耗尽的有效性.
• 评估主要抗体成分对HCP定性和定量分析的影响.

主要方法:

• 开发一个强大的高pH-低pH二维逆相纳米LC-MS/MS无标签量化 (2D纳米LC-MS/MS LFQ) 方法.
• 合成和应用经济的六合体连接体磁珠 (HLMB) 用于HCP丰富.
• 使用HLMB/A蛋白消耗与其他预处理方法对HCP水平的比较分析.

主要成果:

• HLMB的IgG抗体结合能力与蛋白A相比较.
• 使用HLMB/ProA材料去除抗体,在化缓冲中显著增加了HCP.
• 确定了22名医疗保健人员,其中低分子量医疗保健人员的敏感度低至0.1ppm.

结论:

• 建立了一种经济有效的方法,用于对抗体进行全面的HCP评估.
• 该研究强调了主要抗体成分对HCP分析的重大影响.
• 开发的HLMB方法为生物制药中的HCP检测提供了更好的灵敏度和可靠性.