基于细胞的糖基工程用于生产具有改善效应器功能的均和特异性糖形丰富抗体

科学领域:

• 生物技术是生物技术.
• 免疫学 免疫学 免疫学
• 葡萄糖生物学 葡萄糖生物学

背景情况:

• 在Asn297的Fc糖化对于ADCC,ADCP和ADVE等抗体效应器功能至关重要.
• 治疗性IgG抗体与α2,6-sialyl复合体类型 (SCT) 甘氨酸增强Fc受体结合.
• 目前用于均Fc-SCT甘氨酸生产的方法复杂,涉及多个体外步骤.

研究的目的:

• 开发高效的基于细胞的方法,以生产具有改进的Fc糖化和增强的效应器功能的抗体.
• 使用新型细胞工程策略产生Fc-GlcNAc抗体和Fc-SCT丰富的抗体.
• 评估工程抗体与参与细胞介导免疫的Fc受体的结合亲和力.

主要方法:

• 在Expi293F GnT1细胞中表达的内葡萄糖酶S2产生Fc-GlcNAc抗体,用于随后的体外转糖化.
• 在HEK293T细胞中通过敲除特定的葡萄糖转移酶和敲除其他细胞来丰富Fc-SCT抗体来设计葡萄糖化途径.
• 评估了富含Fc-SCT抗体对Fc受体的结合能力,这些受体介导ADCC,ADCP和ADVE.

主要成果:

• 通过内葡萄糖酶S2表达和酶修饰成功产生Fc-GlcNAc抗体.
• 通过对HEK293T糖化途径的向工程产生富含Fc-SCT抗体.
• 与同质的Fc-SCT抗体相比,富含Fc-SCT抗体对Fc受体具有可比或优异的结合.

结论:

• 基于细胞的策略提供了一种更简单的方法,可以通过优化Fc糖化来产生抗体.
• 工程化Fc糖化,特别是Fc-SCT丰富,显著增强了抗体效应器功能.
• 这些发现为开发更强效的抗体疗法铺平了道路,提高了细胞介导杀伤能力.