在体外基因编辑使用从表达Cas9的猪中获得的原始细胞
Seokho Kim1, Jin-Gu No1, Seunghoon Lee1
1Animal Biotechnology Division, National Institute of Animal Science, Rural Development Administration, Wanju 55365, Korea.
Journal of animal science and technology
|February 20, 2025
概括
研究人员开发了一种新的Cas9表达猪模型,用于高效的基因编辑. 这个平台简化了为农业和生物医学进步创造转基因猪的流程.
科学领域:
- 遗传学 是一个遗传学.
- 动物生物技术动物生物技术
- 分子生物学分子生物学
背景情况:
- 聚类正规间隔短时间的Palindromic重复/CRISPR相关蛋白9 (CRISPR/Cas9) 技术使猪的基因编辑成为可能.
- 产生基因工程猪目前是时间和劳动密集型.
- 由于Cas9核酶的大小,现有的体内基因编辑方法面临效率挑战.
研究的目的:
- 开发一个更有效的平台来产生基因编辑猪.
- 为简化基因编辑创建具有构成Cas9表达的猪模型.
- 为体内和体外基因编辑应用建立一个资源.
主要方法:
- 通过将 Cas9 基因集成到 ROSA26 位点中,生成了一个转基因猪.
- 在产生的猪的各种组织中确认了构成性Cas9表达.
- 评估了表达Cas9的猪的生育能力.
- 使用来自猪的原始细胞进行了体外基因编辑实验.
主要成果:
- 成功生成了一个具有构成性Cas9表达的肥沃猪.
- 在试验室中通过将单一指导RNA (sgRNA) 添加到原始细胞中来证明有效的基因删除.
- ROSA26位点促进了稳定和广泛的Cas9表达.
结论:
- 开发的表达Cas9的猪可以作为基因编辑的有效平台.
- 这种模式显著简化和加速了转基因猪的生产.
- 该平台有潜力通过高效的基因编辑推进农业和生物医学研究.
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