使用CIMmultus单质OH列染色学用于治疗目的的细菌菌体净化

科学领域:

• 微生物学 微生物学
• 生物技术是生物技术.
• 生物制药制造业 生物制药制造业

背景情况:

• 菌体是感染细菌的病毒,正在被探索作为抗生素耐药性感染的治疗方法.
• 有效的细菌菌体净化对于治疗应用至关重要,特别是从gram负细菌溶解物中去除内毒素和宿主蛋白质.
• 目前的净化方法在临床级生产的可扩展性和效率方面面临挑战.

研究的目的:

• 评估CIMmultus OH-单质色谱对净化感染Pseudomonas aeruginosa的尾巴菌的效率.
• 评估细菌准备剂中宿主蛋白和内毒素的减少.
• 为了确定纯化的细菌菌体是否适合用于治疗用途,特别是用于静脉注射.

主要方法:

• 研究了7种大小相似的尾状菌体 (Myoviridae和Sifhoviridae家族) 感染Pseudomonas aeruginosa.
• 采用优选排斥色谱与酸盐梯度用于净化.
• 分析了菌体恢复率,宿主蛋白减少和净化后的内毒素水平.

主要成果:

• 在宿主蛋白质 (平均98.5%) 和内毒素 (高达6.30日志减少) 中实现了显著的减少.
• 所有净化的样本都达到人体静脉注射内毒素限值.
• 菌体恢复率各不相同,较小的菌体恢复率为85-95%,较大的菌体恢复率较低.
• 在大多数样本中,在净化后观察到DNA含量增加.

结论:

• CIMmultus OH-单质色谱是一种有希望的,可扩展和可重复的临床级细菌菌体净化方法.
• 染色学策略有效地去除污染物,产生符合治疗标准的菌体制剂.
• 这种方法适合工业菌体生产,因为它的效率和缺乏危险化学品.