关于产生寨卡病毒样颗粒的关键参数
Vinícius Aragão Tejo Dias1, Ana Luiza Moraes Octaviano1, Júlia Públio Rabello1
1Laboratório de Engenharia de Bioprocessos. Escola de Artes, Ciências e Humanidades (EACH), Universidade de São Paulo, Rua Arlindo Béttio, 1000, São Paulo, SP CEP 03828-000, Brazil.
Journal of virological methods
|February 20, 2025
概括
在Sf9细胞中优化寨卡病毒样粒子 (VLP) 生产需要仔细控制溶解氧张力 (DOT) 和感染的多重性 (MOI). 低DOT (5%) 和MOI (0.2) 显著提高了用于疫苗开发的VLP产量和质量.
科学领域:
- 生物技术和生物加工
- 病毒学和疫苗开发
- 细胞培养和发酵技术
背景情况:
- 寨卡病毒构成了全球健康威胁,需要有效的疫苗策略.
- 病毒样颗粒 (VLP) 为寨卡病毒疫苗开发提供了一个安全和免疫的平台.
- 优化VLP生产对于有效的疫苗制造至关重要.
研究的目的:
- 使用Sf9昆虫细胞优化上游生产寨卡病毒样颗粒 (VLPs).
- 评估关键过程参数,包括介质补充,多重感染 (MOI) 和溶氧张力 (DOT) 对VLP产量和质量的影响.
- 为了确定可扩展的VLP生产的最佳条件.
主要方法:
- 在使用Sf-900TM III介质的生物反应器中培养Sf9细胞.
- 分析细胞生长动力学,营养消耗和代谢物产生.
- 在不同的MOI和DOT条件下使用Dot Blot,Western Blot和传输电子显微镜进行VLP生产的表征.
主要成果:
- Sf9细胞表现出指数增长,具有典型的营养成分.
- 在低MOI (0.2) 和低DOT (5%的空气和度) 实现了更高的VLP产量,减少了蛋白质降解和营养消耗.
- 优化条件 (低DOT,没有胆固醇/白蛋白补充剂) 增加了VLP产量而不增加病毒载量,产生32-73nm的VLP.
结论:
- 控制5%空气和度的DOT和使用低MOI (0.2) 是提高寨卡病毒VLP生产效率的关键.
- 优化这些上游参数显著影响工艺经济性和商业制造的可扩展性.
- 这项研究为Zika VLP基础疫苗的高效上游开发提供了关键的见解.


