使用成像流细胞计在体外抗体基刺激下研究T细胞受体动力学
Akihiro Isozaki1,2, Kazuma Kita3, Natsumi Tiffany Ishii2
1Department of Mechanical Engineering, Ritsumeikan University, Kusatsu, Shiga, Japan.
概括
使用抗体刺激研究了T细胞受体动态. 在细胞因子产生之前,CD3和CD28受体表现出明显的表面变化,表明潜在的早期激活标志物.
科学领域:
- 免疫学 免疫学 免疫学
- 细胞生物学 细胞生物学
- 生物物理学的生物物理.
背景情况:
- T细胞是通过T细胞受体 (TCR) 和免疫突触被抗原呈现细胞 (APC) 激活的关键免疫反应体.
- 影像流细胞计允许对细胞相互作用进行详细分析,但体外T细胞受体动态在刺激后缺乏全面的研究.
研究的目的:
- 为了研究T细胞表面受体 (CD3和CD28) 在没有APC的情况下以体外抗体为基础的刺激后的时间动态.
- 为了确定受体形态变化是否先于下游激活事件,如细胞因子生产.
主要方法:
- 建立了一个Th1细胞克隆用于体外基于抗体的刺激,使用离心,抗人类CD3和抗人类CD28抗体.
- 利用成像流细胞测量来捕获和分析单个细胞在刺激后的不同时间点的明亮场和光图像.
主要成果:
- CD3和CD28受体在刺激后立即在T细胞表面表现出明显的时间迁移模式.
- CD3受体分散了3.5小时,而CD28受体在刺激后的7.5小时内保持集群.
- 观察到的CD3和CD28受体分布的形态变化先于可测量的细胞因子产生.
结论:
- 在体外刺激后CD3和CD28受体的独特时间动态为T细胞激活机制提供了洞察力.
- CD3和CD28受体再分配模式可以作为T细胞激活的早期指标,在细胞因子释放之前.
