在Pichia pastoris中生产的工程SARS-CoV-2 S1糖蛋白作为候选疫苗抗原

科学领域:

• 生物技术是生物技术.
• 疫苗学 疫苗学 疫苗学
• 蛋白质工程是指蛋白质工程.

背景情况:

• 由于抗病毒和抗炎治疗的成功有限,由SARS-CoV-2引起的COVID-19大流行需要开发有效的疫苗.
• 与哺乳动物或昆虫系统相比,Pichia pastoris酵母表达系统提供了一个低成本和高效的替代方案,用于生产重组蛋白质.
• 现有的针对乙型肝炎病毒和人类乳头瘤病毒的商业疫苗是使用酵母表达系统成功生产的.

研究的目的:

• 在Pichia pastoris表达系统中构建和表达与人类Fc域 (S1Fc) 融合的仿真S1蛋白.
• 评估标准和GlycoSwitch酵母菌株中S1Fc蛋白的表达,抗原性和产量.
• 评估Pichia pastoris的可行性,作为一种具有成本效益的平台,用于生产针对SARS-CoV-2的潜在疫苗抗原.

主要方法:

• 构建一个编码子优化的pPICZaA-S1Fc表达向量,编码仿真S1Fc蛋白.
• 在两种Pichia pastoris菌株中S1Fc蛋白的表达:一种标准的甘化菌株和一种类似哺乳动物的GlycoSwitch菌株.
• 使用SDS-PAGE和西部斑块分析S1Fc表达,通过ELISA进行抗原性评估,并使用蛋白质G染色学进行净化.

主要成果:

• 成功地表达了S1Fc蛋白 (大约. 130 kDa) 在两个酵母菌株中得到证实.
• 该GlycoSwitch菌株表现出增强的抗原性,表明一种更为本地化的糖化模式.
• 蛋白G染色学从GlycoSwitch菌株获得14.6微克/毫升,从标准菌株获得18.9微克/毫升.

结论:

• 皮奇亚牧羊虫的表达系统提供了一种具有成本效益的方法来生产嵌合体S1Fc蛋白.
• 该GlycoSwitch菌株显示出改善抗原呈现的潜力,这需要进一步研究疫苗应用.
• 建议进行进一步的研究,以探索S1Fc蛋白作为可行的疫苗抗原候选人.