在CHO-DG44细胞中增强复合马性胆道淋巴激素 (rec-eCG) 的生产和功能特征

科学领域:

• 生物技术是生物技术.
• 内分泌学 在内分泌学.
• 分子生物学分子生物学

背景情况:

• 马的胆性淋巴激素 (eCG) 在非马类物种中模仿毛囊刺激激素 (FSH) 和黄素化激素 (LH).
• 再组合蛋白质的生产对于治疗和研究应用至关重要.
• 了解eCG的信号机制对于其潜在的使用至关重要.

研究的目的:

• 通过使用中国仓鼠卵巢 (CHO) DG44细胞建立重组eCG (rec-eCG) 的大规模生产.
• 描述rec-eCG的生物活动,包括其类似FSH和LH的特性.
• 为了阐明由rec-eCG.activated激活的细胞内信号通路.

主要方法:

• 在CHO DG44细胞中表达单链rec-eCG β/α.
• 在表达各种激素受体 (eLH/CGR,rLH/CGR,rFSHR) 的CHO-K1和HEK 293细胞中进行功能测试.
• 通过PathHunter测试评估pERK1/2激活和β-arrestin2招募.

主要成果:

• 稳定的CHO DG44细胞系产生了高水平的rec-eCG (364-470 IU/mL).
• Rec-eCG表现出剂量响应的cAMP活性和与特定受体增强的功效.
• 鉴定证实了N-糖化,并揭示了快速的pERK1/2激活和受体介导的β-arrestin 2招募.

结论:

• 稳定的CHO DG44细胞适用于大规模的rec-eCG生产.
• Rec-eCG具有显著的FSH和LH类生物活性.
• eCG信号涉及通过PKA/cAMP和β-arrestin 2招募的pERK1/2激活.