实验室冷软X射线显微镜的样品制备协议用于研究细胞纳米粒子吸收
Komang G Y Arsana1, Martin Svenda1, Hans M Hertz1
1Biomedical and X-Ray Physics, Department of Applied Physics, KTH Royal Institute of Technology, 10691 Stockholm, Sweden.
International journal of molecular sciences
|February 26, 2025
概括
本研究介绍了用于实验室软X射线显微镜 (LSXM) 的样本制备协议,以可视化细胞纳米粒子吸收. 优化的玻璃化确保了薄,高对比度的样本,以改善生物结构的成像.
科学领域:
- 生物医学成像技术 生物医学成像技术
- 细胞生物学 细胞生物学
- 纳米技术纳米技术
背景情况:
- 软X射线显微镜 (SXM) 提供近原生状态的生物样本的高分辨率成像.
- 实验室软X射线显微镜 (LSXMs) 旨在弥合光和电子显微镜之间的分辨率差距.
- 与同步光子相比,LSXM对比度可以通过较低的X射线源亮度来限制,因此需要优化样品准备.
研究的目的:
- 开发和详细说明LSXM的样品制备协议,重点是细胞纳米粒子吸收.
- 优化LSXM的样本准备,以克服与实验室X射线源相关的对比度限制.
- 为了证明该协议在可视化不同细胞类型内的纳米粒子相互作用方面的有效性.
主要方法:
- 开发用于手动结和自动玻璃化技术的优化参数.
- 确保生物样本快速过渡到有控制的冰厚 (5-10微米) 的玻璃化状态.
- 该协议应用于小鼠巨细胞和acanthamoeba,用于纳米粒子吸收研究.
主要成果:
- 该协议在快速冷过程中成功保存了细胞结构.
- 控制的冰厚可促进X射线的最佳传输,增强图像对比度.
- 对纳米粒子吸收的有效可视化在小鼠巨细胞和acanthamoeba中都得到了实现.
结论:
- 优化样品准备,特别是控制冰厚,对于使用LSXM进行高质量的SXM成像至关重要.
- 该协议使得细胞纳米粒子相互作用的详细研究能够得到改善的对比度和分辨率.
- 开发的方法增强了LSXM在生物医学研究中的实用性,特别是在纳米医学和毒理学领域.


