相关实验视频

Updated: May 24, 2025

Generation of Knock-out Primary and Expanded Human NK Cells Using Cas9 Ribonucleoproteins

Generation of Knock-out Primary and Expanded Human NK Cells Using Cas9 Ribonucleoproteins

Published on: June 14, 2018

一个关于NFKB1/NFKB2淘汰赛Jurkat细胞和由CRISPR/Cas9介导的基因破坏产生的初级CD4+T细胞的数据集

Erika Osada¹, Yoshinobu Manome¹, Yohei Sato¹

¹Core Research Facilities, Research Center for Medical Sciences, The Jikei University School of Medicine, Tokyo, Japan.

|March 3, 2025

概括

调查核因子-kappa B (NF-kB) 在T细胞中的信号传递,这项研究使用了CRISPR/Cas9基因编辑. NF-kB1/NF-kB2淘汰细胞表现出类似的静止状态表型和基因表达特征.

科学领域:

免疫学免疫学免疫学
分子生物学分子生物学
细胞生物学细胞生物学

背景情况:

人类T细胞中非正规核因子-kappa B (NF-kB) 信号通路的特定生物学作用尚未完全理解.
NF-kB信号传递对T细胞激活,分化和生存至关重要,但其在休息T细胞中的精确功能需要进一步阐明.

研究的目的:

在人类T细胞中基因研究NF-kB信号传导,特别是NFKB1和NFKB2的生物学作用.
了解NFKB1和NFKB2基因淘汰对T细胞表型和基因表达特征的影响.

主要方法:

使用聚类正规间隔的平行体重复 (CRISPR) /CRISPR相关蛋白9 (Cas9) 基因编辑技术.
基因改造的Jurkat白血病细胞和原始人类CD4+T细胞,以击败NFKB1和NFKB2位点.
使用定量聚合酶连锁反应 (qPCR) 和光激活细胞分类 (FACS) 进行分析.

主要成果:

在NFKB2-被淘汰的细胞中观察到IKAROS家族指-2的下调,而在没有刺激的NFKB1-被淘汰的细胞中观察到上调.
在原始人类CD4+T细胞中,CRISPR/Cas9介导的NFKB1和NFKB2的淘汰导致了在静止状态下类似的表型和基因表达特征.
在Jurkat细胞中的NFKB1/NFKB2双击也表现出明显的基因表达变化.

结论:

在T细胞中,NF-kB1和NFKB2在调节IKAROS家族指-2表达方面发挥着不同的作用.
人类CD4+T细胞中NFKB1/NFKB2的基因编辑导致可比的表型和静止时的基因表达特征,这表明在没有激活信号的情况下具有协调或冗余的作用.

关键词:

CD4+ T 细胞是 CD4+ T 细胞.这就是CRISPR/Cas9的作用.尤尔卡特细胞是Jurkat细胞.NFKB1 是一个国家.NFKB2 是否存在

更多相关视频

Gene Knock-in by CRISPR/Cas9 and Cell Sorting in Macrophage and T Cell Lines

Gene Knock-in by CRISPR/Cas9 and Cell Sorting in Macrophage and T Cell Lines

Published on: November 13, 2021

Genome Engineering of Primary Human B Cells Using CRISPR/Cas9

Genome Engineering of Primary Human B Cells Using CRISPR/Cas9

Published on: November 3, 2020

相关概念视频

In-vitro Mutagenesis

In-vitro Mutagenesis

To learn more about the function of a gene, researchers can observe what happens when the gene is inactivated or “knocked out,” by creating genetically engineered knockout animals. Knockout mice have been particularly useful as models for human diseases such as cancer, Parkinson’s disease, and diabetes.