使用COMETTM系统对中枢神经系统进行高维蛋白质多重体成像

科学领域:

• 神经科学是一个神经科学.
• 生物技术是生物技术.
• 医疗成像医学成像

背景情况:

• 序列复合方法需要抗体修改,限制试剂的使用,并需要验证.
• 固定抗体面板面临的局限性包括光谱重叠,硬质障碍和组织降解.
• 目前用于中枢神经系统细胞分析的方法往往具有低通量,缺乏灵活性.

研究的目的:

• 开发和验证一种中枢神经系统特异性抗体库和分析平台,用于高通量细胞分析.
• 利用Lunaphore COMETTM自动化平台进行无标签的初级抗体和二次抗体检测.
• 解决人类中枢神经系统中对灵活和高效空间配置的未满足需求.

主要方法:

• 使用自动化的Lunaphore COMETTM平台进行染色和成像,用甲固定嵌入式 (FFPE) 中枢神经系统组织学幻灯片.
• 开发并验证了中枢神经系统特异性抗体库,包括管理中枢神经系统自光的策略.
• 使用现成的无标签初级抗体和用光标记的二次抗体用于自动化幻灯片处理.

主要成果:

• 在COMETTM平台上成功编目和验证了一系列用于中枢神经系统空间分析的抗体.
• 在中枢神经系统中实现了细胞群和细胞网络的亚细胞水平可视化和量化.
• 证明了每样本分析高达40种分析物的能力,对于有限的中枢神经系统活检样本具有显著的临床实用性.

结论:

• 建立了在中枢神经系统内成像和量化细胞群和细胞网络的一般框架.
• 为科学界提供了针对中枢神经系统空间分析的优化标准操作程序.
• 开发的平台为推进神经科学研究和诊断提供了灵活和高效的解决方案.