基于RNA脚掌开关的记者试验,以评估细菌对反意义寡合物的吸收

科学领域:

• 微生物学和分子生物学
• 发现抗微生物药物 发现抗微生物药物
• 生物技术是生物技术.

背景情况:

• 抗菌素耐药性是一个日益增长的全球健康威胁,需要新的治疗策略.
• 反感小聚合物 (ASO) 通过向细菌基因表达,显示出其作为精密抗生素的潜力.
• 在整个细菌包裹中有效地提供ASO,以及评估吸收的方法仍然是重大挑战.

研究的目的:

• 开发一种新型的记者试验,用于半定量测量细菌中的反感性寡合体 (ASO) 吸收效率.
• 在细菌病原体中选和识别有效的细胞透 (CPP) 作为基于PNA的ASO的载体.
• 为了实现细菌ASO载体的高通量查,并调查ASO吸收机制.

主要方法:

• 开发一个"开关"的记者测试,使用合成RNA的脚开关与光记者mRNA融合.
• 基于核酸 (PNA) 的ASOs在细菌细胞质中激活报告系统in vivo.
• 选各种细胞透 (CPPs) 作为ASO载体在大肠杆菌和沙门氏菌中.

主要成果:

• 观察到对报告者试验的激活率高达60倍,这表明基于CPP和细菌菌株的ASO吸收效率存在显著差异.
• 证明了测试的高动态范围和灵敏度,适合高通量选.
• 利用报告员研究PNA吸收路径,在没有内膜蛋白SbmA的情况下显示活性降低.

结论:

• 开发的记者测定是发现特定物种和高效的ASO载体用于抗菌应用的宝贵工具.
• 这种测定有助于推进新型,精确的基于反感应的抗菌疗法,以对抗抗菌素耐药性.
• 报告员系统可以广泛应用于研究抗菌ASO和其他基于核酸的治疗方法的细胞吸收机制.