同焦激光扫描平台与现场高分辨率量化相位成像相结合
Wenjing Feng1,2,3, Hongfei Suo1,2,3, Ying Ma1,2,3
1School of Physics, Xidian University, Xi'an, China.
Journal of biophotonics
|March 7, 2025
概括
这项研究表明,共聚焦光显微镜会比广场方法少伤害细胞. 将定量相对照显微镜与共聚焦成像相结合,为细胞生物学研究提供了一个强大的工具.
科学领域:
- 细胞生物学 细胞生物学
- 显微镜的使用方法
- 生物物理学的生物物理.
背景情况:
- 同焦激光扫描显微镜和定量相对比显微镜是有价值的成像技术.
- 评估不同光激发方法引起的细胞损伤对于活细胞成像至关重要.
- 整合多种成像模式可以提供更丰富的生物信息.
研究的目的:
- 开发和验证一个先进的双模式成像平台,将共聚焦激光扫描/成像与平面场定量相对比显微镜 (FF-QPCM) 结合起来.
- 为了比较由共聚焦光激发与广场光激发 (WFE) 引起的细胞损伤.
- 为了研究局部对焦激光照射对活细胞的影响.
主要方法:
- 与FF-QPCM集成一个共聚焦激光扫描/成像模块.
- 样品的双模式成像,用于同时获取相位和光数据.
- 对细胞损伤的比较分析 (例如,线粒体碎片化,相值变化) 后的对焦和WFE.
- 在现场定量相位成像活的COS7细胞受到局部聚焦激光照射.
主要成果:
- 双模式平台实现了高分辨率,高对比度相/光成像.
- 与WFE相比,对焦光激发诱导的细胞损伤最小,这导致了显著的线粒体分裂和相位变化.
- 局部5分钟的共聚焦激光照射主要影响COS7细胞中的光标记的线粒体,导致细胞功能障碍.
结论:
- 集成的FF-QPCM和共聚焦激光扫描/成像平台是细胞生物学的一个高效,敏感和信息丰富的工具.
- 与WFE相比,对焦激发是活细胞光成像的更温和的方法.
- 这种先进的成像方法具有广泛的潜力,用于研究细胞动态和对激光照射的反应.
