通过乙完全禁用奥托弗拉维和阿尔法病毒,以通过ELISA进行安全定位

科学领域:

• 病毒学 病毒学
• 细胞生物学 细胞生物学
• 传染性疾病 传染性疾病

背景情况:

• 组织培养感染剂量50 (TCID50) 试验对于定位具有最小细胞病变影响的病毒至关重要.
• 酶相关免疫吸收试验 (ELISA) 通过检测病毒抗原来增强TCID50的特异性.
• 在ELISA之前,甲 (PFA) 和是病毒感染细胞的常见固定剂,已知4%的PFA会使某些病毒失活.

研究的目的:

• 为了评估标准的乙烯酸固定方法 (20%的乙烯酸) 与甲 (PFA) 相比,对病毒无活化的有效性.
• 为了确定替代性乙度是否可以安全地使蚊子传播的orthoflavi和alphavirus无活化,用于TCID50/ELISA测定.

主要方法:

• 蚊子传播的病毒,登革热病毒 (DENV) 和罗斯河病毒 (RRV) 被用作模型病毒.
• 感染了DENV和RRV的细胞被固定使用不同的度的乙 (20%和50%) 和4%的PFA.
• 病毒传染性在固定后进行评估.
• 在固定细胞上进行ELISA检测病毒抗原和确定病毒标位.

主要成果:

• 50%的乙和4%的PFA有效地使DENV和RRV两者失活.
• 20%的乙固定并没有显著降低DENV或RRV的传染性.
• 对DENV和RRV抗原的ELISA检测在50%的乙固定的细胞中是成功的,产生与20%的乙固定的细胞相似的标位.

结论:

• 标准的20%的乙固定是不足以禁用orthoflavi和alphavirus的.
• 50%的乙提供有效的病毒失活,允许在低生物含量条件下安全处理和处理TCID50/ELISA试验中的DENV和RRV.
• 这项研究建立了使用TCID50/ELISA方法对树病毒进行定位的更安全的固定协议.