基于原始纸的免疫测试装置,使用CRISPR/Cas12a信号放大
Hikaru Suzuki1, Guodong Tong1, Pabitra Nath2
1Department of Applied Chemistry, Faculty of Science and Technology, Keio University, 3-14-1 Hiyoshi, Kohoku-ku, Yokohama, Kanagawa 223-8522, Japan.
ACS sensors
|March 10, 2025
概括
这项研究将CRISPR/Cas12a与纸质ELISA集成,用于快速,敏感的蛋白质检测. 这种新方法显著提高了乙型肝炎表面抗原等点的检测极限,使得点诊断成为可能.
科学领域:
- 生物技术是生物技术.
- 分子诊断学 分子诊断
- 测试开发 测试开发
背景情况:
- 传统的酶相关免疫吸收试验 (ELISA) 对于临床诊断是耗时的.
- 纸质ELISA提供更快,更便宜的分析,但往往缺乏灵敏度.
- 纸质测试的有限灵敏度阻碍了对低度标的临床应用.
研究的目的:
- 为非核酸目标开发一种简单,快速和高度灵敏的检测方法.
- 将CRISPR/Cas12a系统集成到纸质ELISA平台中.
- 为了提高基于纸张的免疫试验的敏感性,用于临床诊断.
主要方法:
- 设计了一种基于纸张的原木类型装置用于测试操作.
- 使用CRISPR/Cas12a酶与光体/灭器标记的ssDNA探针进行光检测.
- 采用用DNA标记的抗体来激活CRISPR/Cas12a以提高信号放大.
主要成果:
- 对人类IgG和B型肝炎病毒表面抗原 (HBsAg) 的检测灵敏度显著提高.
- 与商业ELISA套件 (200 pg/mL) 相比,HBsAg的检测极限 (LOD) 为12 pg/mL,比商业ELISA套件提高了10倍以上.
- 在使用智能手机成像进行定量分析的猪全血样本中验证光检测.
结论:
- 开发的CRISPR/Cas12a集成纸质ELISA平台提供高灵敏度和快速检测.
- 该平台显示了临床诊断的潜力,克服了现有的纸质分析的局限性.
- 这种方法有助于在复杂的生物样本中敏感检测非核酸点.
更多相关视频
10:16Author Spotlight: Development of Simplified CRISPR-Based Tests for Rapid Detection of Infectious Diseases
Published on: August 16, 2024
1.0K
09:03Field-Deployable Candidatus Liberibacter asiaticus Detection Using Recombinase Polymerase Amplification Combined with CRISPR-Cas12a
Published on: December 23, 2022
2.5K
