在药物代谢和药理动力学中有效量化蛋白质,加快蛋白质组工作流程
Xiaofeng Wu1, Nicholas Ferguson1, Lloyd Wei Tat Tang1
1Pharmacokinetics, Dynamics, and Metabolism, Pfizer Inc, Groton, Connecticut.
概括
一种新的快速表面活性剂处理 (FAST) 蛋白质组学方法改善了药物代谢和运输蛋白质的量化. 这种高效的工作流提高了ADME生物分析的速度和准确性.
科学领域:
- 药理学 药理学是指药理学的学科.
- 生物化学 生物化学
- 分析化学 分析化学
背景情况:
- 精确量化药物代谢酶和载体对于了解药物处置和药理动力学至关重要.
- 目前用于ADME分析的蛋白质组学方法面临诸多挑战,包括不良的鉴定和耗时的工作流程.
研究的目的:
- 评估和比较针对性的ADME蛋白质组方法,包括一种新的快速表面活性剂处理 (FAST) 方法.
- 评估人类肝细胞中ADME蛋白质组分析的FAST方法的效率和稳定性.
主要方法:
- 开发和应用快速表面活性剂处理 (FAST) 蛋白质组工作流程.
- 使用了脱氧化洗剂和快速的乙二沉/离心步骤,用于蛋白质溶解和消化.
- 与传统的工作流程使用dithiothreitol降解和乙胺化相比,FAST.
主要成果:
- 在人类肝细胞中,FAST证明了蛋白质的有效溶解和消化,特别是膜蛋白.
- 与传统方法相比,实现了细胞染色体P450s,UDP-glucuronosyltransferases (4倍) 和转运体 (5倍) 的量化显著增加.
- 对于特定的ADME蛋白质,FAST产生了更高的信号噪声比,并缩短了样本处理时间.
结论:
- FAST蛋白质组学工作流是一个强大,高效和多功能方法,用于ADME生物分析.
- FAST提供了一种简化协议,缩短了基板时间,使得关键ADME蛋白质的量化更有效.
