使用电荷检测质谱和行业标准方法表征单克隆抗体聚合

科学领域:

• 生物化学 生化学
• 蛋白质化学 蛋白质化学
• 分析化学 分析化学

背景情况:

• 蛋白质聚合与神经退行性疾病有关,并可能降低基于蛋白质的生物治疗药物的疗效和安全性.
• 了解单克隆抗体 (mAbs) 的聚合和降解途径对于生物制药开发和患者安全至关重要.

研究的目的:

• 调查不同压力条件对单克隆抗体 (mAb) - (F) 复合物的聚合和降解的影响.
• 为了比较尺寸排除色谱 (SEC),四极飞行时间 (QTOF) 和电荷检测质谱 (CDMS) 在表征mAb聚合物的能力.

主要方法:

• 使用尺寸排除染色学 (SEC) 分析单克隆抗体 (M) - 化物 (F) 复合体.
• 使用四极飞行时间 (QTOF) 质谱测量对mAb-合物复合物的表征.
• 使用电荷检测质谱法 (CDMS) 进行高质量聚合物分析.
• 将复合体置于冷解周期和长期热应激中,以诱导聚合和降解.

主要成果:

• 尺寸排除色谱 (SEC) 无法解析高阶mAb聚合物.
• 通过QTOF质谱测量,可以分辨到MF₂的复合物,而CDMS识别的物种大小达M₅F₃.
• 四分之二的mAbs形成了一个热应力敏感的M₂F复合体.
• 其他两个mAbs分别在冷解和热应力下显示降解和MF₂复合体形成.

结论:

• 单克隆抗体序列在压力下显著影响聚合和降解途径.
• 综合质谱方法 (QTOF和CDMS) 是描述mAb稳定性和聚合性的强大工具.
• 了解压力引起的mAbs变化对于预测和预防患者不良结果至关重要.