在生物样本中测定和的颜色
Aaron P Donaghy1, Gerrit J Schut1, Nana Shao1
1Department of Biochemistry and Molecular Biology, University of Georgia, Athens, GA, USA.
Bio-protocol
|March 14, 2025
概括
一种新的色度测定法允许在生物样本中快速,高通量测量 (Mo) 和 (W). 这种方法使用氨酸复合和光谱测量,为酶研究提供了比ICP-MS更快的替代方案.
科学领域:
- 生物化学 生物化学
- 分析化学 分析化学
- 生物技术是生物技术.
背景情况:
- (Mo) 和 (W) 是生物系统中必不可少的元素,主要在酶催化场所发挥作用.
- 目前在生物样本中测量Mo和W的方法,如ICP-MS,是昂贵和耗时的.
- 对于的现有色度测量方法不适合生物矩阵,如蛋白质提取物.
研究的目的:
- 开发一种快速且易于使用的色度测试方法,用于在生物样本中量化和.
- 适应现有的色度测量技术,用于变质生物样本,包括纯化蛋白质和细胞质提取物.
- 为在酶净化和表征过程中选Mo和W水平提供高通量方法.
主要方法:
- 一种色度测定方法是基于夸尔素与酸盐 (MoO4^2-) 或酸盐 (WO4^2-) 的复合而开发的.
- 该试验采用96井板格式,根据现有的非生物样本方法进行了调整.
- 在419 nm的吸收位移的光谱光度测量量量化了Mo和W度.
主要成果:
- 该试验提供了一个与Mo或W度的增加相称的红色移转,在奎尔素吸收度.
- 该方法有效测量Mo和W在1-20μM范围内.
- 该协议针对蛋白质样本进行了优化,并允许快速确定金属含量.
结论:
- 在生物样本中建立了一种新的,快速的对和的色度测定方法.
- 这种方法提供了一个具有成本效益和高通量替代传统分析技术,如ICP-MS.
- 该试验适用于选生物样本中的金属含量,特别是在蛋白质净化过程中,尽管它不能区分Mo和W.


