使用基于光的生物化学试验量化Drosophila中的自由基总量
Shahira Helal Arzoo1, Rubaia Tasmin1, Surya Jyoti Banerjee1
1Department of Biological Sciences, Texas Tech University, Lubbock, TX, USA.
Bio-protocol
|March 14, 2025
概括
量化果中自由基的总数,包括活性氧物种 (ROS) 和活性物种 (RNS),使用一种新的光测定方法. 这种方法简单,可扩展,非常适合研究Drosophila melanogaster中的氧化应激.
科学领域:
- 生物化学 生物化学
- 分子生物学分子生物学
- 遗传学 遗传学是一种遗传学.
背景情况:
- 氧化应激是由活性氧物种 (ROS) 和活性物种 (RNS) 等自由基诱导的,是细胞信号传递,应激反应和疾病发病的组成部分.
- 准确量化自由基对于阐明氧化应激机制及其生物学影响至关重要.
研究的目的:
- 为测量整个成年Drosophila melanogaster的总自由基 (ROS和RNS) 提供一个高通量,基于光的协议.
- 在各种实验条件下建立一种可扩展和适应的方法,用于研究各种实验条件下的果中氧化应激.
主要方法:
- 成年果 (Drosophila melanogaster) 在PBS中均质化,并用二二二二二二氧化 (DCFH-DiOxyQ) 对待超级.
- DCFH-DiOxyQ与自由基发生反应,形成二二素 (DCF),一种光分子,光强度与自由基水平直接相关.
- 使用基于光的方法进行测量,采用96孔黑板格式,适合高通量分析.
主要成果:
- 该协议成功量化了Drosophila melanogaster样本中的总自由基,包括ROS和RNS.
- 测量的光水平与同质化的样中存在的自由基度成正比.
结论:
- 这种基于光的协议提供了一种简单,可扩展和适应的方法来量化Drosophila melanogaster中的自由基.
- 该试验适用于高吞吐量查,并可用于研究不同饮食,环境,遗传或药理学操纵下果的氧化应激.
