一种简单的方法,通过在没有基化的情况下进行部分减少,为齐科诺提德分配二硫化物连接性
Peize Wu1, Yuya Cheng1, Weihua Wang1
1Division of Chemical Metrology and Analytical Science, National Institute of Metrology, Beijing, P. R. China.
一种新方法简化了酸盐中的二硫化键连接性分析. 该技术使用部分还原和质谱,准确识别二硫化物桥梁,这对于药用质量控制至关重要.
科学领域:
- 生物化学 生化学
- 分析化学 分析化学
- 类化学 类化学
背景情况:
- 二硫化键是对和蛋白质结构,稳定性和生物活性的关键翻译后修饰.
- 药物中的二硫化物连接性不正确,可能导致有效性或免疫性丧失.
- 准确地分配二硫化物连接性对于的表征和质量控制至关重要.
研究的目的:
- 开发一种简单而准确的方法来分配酸盐中的二硫化物连接性.
- 为了证明该方法的实用性,使用齐科诺提德作为模型.
- 为了促进富含二硫化物药用的质量控制.
主要方法:
- 建立了一种新的方法,包括在没有化的情况下进行部分还原.
- 三2-碳氧乙烯) 氨酸用于二硫化物键的部分减少.
- 液体染色学-并联质谱学 (LC-MS/MS) 用于分析部分减少产品并确定二硫化物连接性.
主要成果:
- 该方法准确地分配了齐科诺提德的所有二硫化桥连接,这是一种含有六个半氨酸残留物形成三种二硫化键的.
- 仅对两个部分减少产品的分析就足以确定完全的连接性.
- 这种新的方法成功地在15种可能性中确定了特定的二硫化物异型.
结论:
- 开发了一种结合部分还原和LC-MS/MS分析的简单方法,用于分配中的二硫化物连接性.
- 这种技术对于具有复杂二硫化物网络的的特征是非常有效的.
- 该方法为确保药用的质量和安全提供了有价值的工具.
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