通过HLA型基因淘汰赛生成低免疫性通用iPS细胞
Juryun Kim1, Yoojun Nam1,2, Doyeong Jeon1
1YiPSCELL Inc., Seoul, Republic of Korea.
Experimental & molecular medicine
|March 15, 2025
概括
全球诱导多能干细胞 (iPS) 被设计为通过敲除关键的人类白细胞抗原 (HLA) 基因来逃避免疫排斥. 这种低免疫细胞系,克隆A7,显示出异构疗法的潜力.
科学领域:
- 干细胞生物学 干细胞生物学
- 免疫学 免疫学 免疫学
- 基因编辑 基因编辑
背景情况:
- 全基细胞疗法受到免疫排斥的限制.
- 人类白细胞抗原 (HLA) 在捐赠细胞上的表达会触发免疫反应.
- 诱导多能干细胞 (iPS) 具有治疗潜力,但需要免疫兼容性.
研究的目的:
- 为了产生低免疫性通用iPS细胞用于全基移植.
- 在iPS细胞中破坏关键的HLA基因 (HLA-A,HLA-B,HLA-DRα).
- 为了表征产生的iPS细胞克隆的多能性,分化和免疫性.
主要方法:
- 使用CRISPR-Cas9基因编辑来准HLA-A,HLA-B和HLA-DRA基因.
- 使用指导RNA验证和电穿孔进行基因淘汰 (KO).
- 进行了单细胞克隆,mRNA/蛋白质表达分析,型定型,分化试验和免疫性测试.
主要成果:
- 一个三重KO iPS细胞克隆,被指定为A7,成功生成.
- 克隆A7保持了多能性标志物表达和分化潜力,分为三个胚胎层.
- 克隆A7在干扰素马刺激后没有显示HLA蛋白表达,并且显示出低免疫性,证据是没有T细胞增殖.
结论:
- 使用CRISPR-Cas9对HLA基因的有针对性的破坏可以创建低免疫性iPS细胞.
- 克隆A7表现出免疫逃避特性,同时保留了必不可少的iPS细胞特征.
- 这种低免疫性iPS细胞系对未来基于细胞的全基因疗法具有前景.
