生物发光读取侧流免疫试验使用纳米体向阿弗拉托克辛B1的纳米体
Shun Takahashi1, Yuki Hiruta1, Daniel Citterio1
1Department of Applied Chemistry, Faculty of Science and Technology, Keio University, 3-14-1 Hiyoshi, Kohoku-ku, Yokohama 223-8522, Japan. citterio@applc.keio.ac.jp.
The Analyst
|March 17, 2025
概括
这项研究引入了一种基于生物发光的新型侧流免疫试验 (LFIA),用于检测亚毒素B1 (AFB1). 开发的测定提供了高灵敏度和用户友好性,使其适合食品安全应用.
科学领域:
- 生物技术是生物技术.
- 生物传感器是一种生物传感器.
- 食品安全 食品安全
背景情况:
- 侧流免疫试验 (LFIA) 通常使用色度检测,其灵敏度有限.
- 基于光的LFIA提供更高的灵敏度,但需要激发光源,从而降低了用户友好性.
- 生物发光是一种有吸引力的替代品,因为它具有高的信号噪声比和缺乏激发光的要求.
研究的目的:
- 开发一种简单而敏感的基于生物发光的LFIA,用于检测阿弗拉托克辛B1 (AFB1).
- 为了利用纳米体-纳米化酶 (Nluc) 融合蛋白质在竞争性LFIA格式中进行信号传导.
- 在缓冲溶液和真实食物矩阵中评估试验的性能.
主要方法:
- 开发纳米体-纳米化酶 (Nluc) 融合蛋白质用于生物发光信号生成.
- 用AFB1-BSA结合物固定在测试线上的LFIA设备的制造.
- 用不同的AFB1度在水溶液和加的麦牛奶样本中测试试剂,使用成像系统和数字摄像机进行读出.
主要成果:
- 一个初始的LFIA设置在水溶液中实现了AFB1的0.26 ng/mL的检测极限 (LOD).
- 一个更加用户友好的集成LFIA设备使得AFB1检测的LOD为1.12 ng/mL,可以被标准的数码相机读取.
- 该试验表明,在添加4.09 ng/mL的LOD的麦牛奶样本中有效检测,低于美国监管限制.
结论:
- 基于生物发光的LFIA,利用纳米体-Nluc融合蛋白质,为传统方法提供了灵敏和用户友好的替代方案.
- 开发的试验有效检测AFB1在复杂的矩阵,如麦奶,具有更广泛的食品安全应用的潜力.
- 这种方法克服了色度LFIA的灵敏度限制和基于光的方法的用户友好缺点.
