开发和验证AAV体在样本列上的分离,用于大规模染色学单体的可重复性评估

科学领域:

• 生物技术是生物技术.
• 化学工程是化学工程的重要组成部分.
• 病毒学 病毒学

背景情况:

• 腺相关病毒 (AAV) 病毒载体制造面临着在持续地将完整的囊从空囊分离出来的挑战.
• 染色学方法对于AAV囊分离至关重要,但可能存在可复制性问题.
• 高可重复性 (HR) 染色色列为强大的AAV囊净化提供了一个潜在的解决方案.

研究的目的:

• 定义一种可重复分离空和完全重组的AAV2/8 (E/F rAAV2/8) 毛虫的方法.
• 为了验证四元胺 (QA) 染色学单体的可扩展性和同质性,用于AAV分离.
• 建立用于预测AAV制造中的柱子性能的控制试验.

主要方法:

• 开发了一种使用四等胺 (QA) 染色学单体与线性化 (KCl) 梯度的分离方法.
• 实验证实了使用1,80和800毫升CIMmultus QA柱的可扩展性.
• 采用样本测试方法,采样单体材料来评估同质性和性能.

主要成果:

• 确立了E/F rAAV2/8体的可重复分离,空体的化值在89.4-91.4mM KCl.之间.
• 通过样本测试证明了CIM QA单体的可扩展性和同质性.
• 成功监测了28个生产批次,证实了在各种尺度 (1-8000毫升) 上的一致性能.

结论:

• 开发的方法使使用QA染色学可重复分离空和满AAV体.
• 质量保证单体的样本测试提供了一种可靠的方法,以确保列内和批次对批次的同质性.
• 这项工作支持用于AAV制造的高度可复制的准备性QA色谱单体的商业化.