在常用的合成生物学等离子体中防止多重构成

科学领域:

• 分子生物学分子生物学
• 合成生物学 合成生物学
• 微生物学 微生物学

背景情况:

• 等离子体是研究和生物技术中的重要工具.
• 维护等离子体的完整性,特别是防止多重体的形成,对于优化合成电路至关重要.
• 由于二元分辨率失败而产生的等离子体多元体,可以影响电路功能,特别是在DNA编辑酶方面.

研究的目的:

• 为了调查等离子体多元体在常见的实验室菌株中的发生.
• 识别影响多重体形成的因素.
• 开发策略,以减轻基于等离子体的系统中的多聚合物生产.

主要方法:

• 在克隆 (JM109) 和野生型 (MG1655) Escherichia coli 菌株中调查了四个常见的等离子体骨架.
• 评估了与等离子体拷贝数和培养通过有关的多重分子形成.
• 创建并测试了一种MG1655 ΔrecA单位淘汰菌株,以检测其防止多分子生产的能力.

主要成果:

• 只有在MG1655菌株中观察到有意义的等离子体多元体.
• 在MG1655.5中,多重分子分数随着更高的等离子体拷贝数和延长的培养经过而增加.
• 将多元体转化为JM109导致了缺乏单片质粒的菌株.
• MG1655 ΔrecA淘汰菌株有效地防止了多重体的形成.

结论:

• 在大肠杆菌中,等离子体多元化取决于菌株,特别是在野生型MG1655.5中发生.
• 诸如等离子体拷贝数和传递等因素影响了多分子积累.
• 基因改造,例如创建一个 ΔrecA 淘汰,可以消除多重体生产,提高基于等离子体的合成电路可靠性.