对Luxturna的基于细胞的定量相对功效试验的验证

科学领域:

• * 基因治疗 基因治疗
• * 分子生物学 * 分子生物学
• * 测试发展的试验

背景情况:

• *Voretigene neparvovec-rzyl (Luxturna) 是一种AAV2载体,已被批准用于治疗由RPE65突变引起的遗传性视网膜疾病.
• * 监管部门的批准需要验证的测试来证明生物活性和效力.
• * RPE65蛋白对于视觉循环至关重要,它将全转网醇转化为11-cis-retinol.

研究的目的:

• *为了验证一种以细胞为基础的体外试验,以测量voretigene neparvovec-rzyl (AAV2-hRPE65v2) 的生物活性和相对功效.
• *为了支持监管部门的批准,并确保基因疗法产品的分批一致性.

主要方法:

• * HEK293细胞的转导与AAV2-hRPE65v2向量.
• * 在细胞溶解物中量化载体编码的RPE65蛋白质,使用液态染色学与双重质谱学 (LC-MS/MS) 进行量化.
• *通过七个关键特征验证测定:适用性,特异性,线性,精度,准确性,范围和稳定性.

主要成果:

• * 经过验证的试验准确地测量了AAV2-hRPE65v2转导和随后的RPE65生物活性.
• *该试验证明了在50%-150%的参考标准范围内评估相对功效的可靠性.
• *成功的验证支持对Luxturna制造业的批量对批量一致性,稳定性和可比性评估.

结论:

• *这项研究报告了对AAV载体的体外基于细胞的相对功效试验的首次验证.
• *验证的测定对于确保Luxturna的质量和疗效至关重要,Luxturna是美国首个批准用于遗传疾病的基因疗法.
• *该试验有助于改进制造工艺,并符合基因疗法的监管要求.