使用连续的水性两相提取方法净化未包裹的病毒.

科学领域:

• 生物技术是生物技术.
• 生物加工是一种生物加工.
• 病毒学 病毒学

背景情况:

• 基于病毒的疫苗和疗法需要可扩展和具有成本效益的净化.
• 使用聚乙烯糖醇 (PEG) 和酸盐的水性双相系统 (ATPS) 提供高回收,但带来下游加工挑战.
• 病毒通常被分为粘性PEG丰富的相或ATPS中的接口.

研究的目的:

• 开发第二个ATPS步骤,以便有效地将病毒提取到富含酸盐的阶段.
• 优化ATPS参数,以改善病毒净化和下游兼容性.
• 为了使工业规模的,经济高效的病毒载体制造.

主要方法:

• 通过变化的PEG分子量,相组分度,体积比,盐类型,pH值和糖氨酸添加来研究ATPS性能.
• 专注于优化用于提取非包裹猪帕维病毒 (PPV) 的参数.
• 实施了两步ATPS过程,在两步之间调整化学条件.

主要成果:

• 通过2.0日志移除宿主细胞蛋白质和1.0日志移除宿主细胞DNA,实现了66%的传染性PPV恢复.
• 优化的参数包括pH值转移,相组分度降低,酸盐丰富相体积比率增加.
• 一个8kDa的PEG分子量促进了pH值在没有降水的情况下变化;甘氨酸和酸盐没有显著的恢复改善.

结论:

• 优化的两步ATPS显著改善病毒恢复和杂质去除.
• 这种方法解决了与传统ATPS相关的下游处理挑战.
• 该过程显示了为疫苗和治疗的病毒载体的持续,低成本制造的前景.