在人类细胞系和初级T细胞中,CRISPR启动了表观基因组编辑,用于可编程的基因沉默
Rithu K Pattali1, Izaiah J Ornelas1, Carolyn D Nguyen1
1Department of Molecular and Cell Biology, University of California, Berkeley, Berkeley, CA, United States.
Methods in enzymology
|March 22, 2025
概括
CRISPR的表观遗传编辑可以在没有DNA断裂的情况下建立可遗传的基因抑制. 本协议详细介绍了CRISPR对人类细胞精确基因沉默的发射和评估.
科学领域:
- 分子生物学分子生物学
- 表观遗传学 在表观遗传学中,表观遗传学是指表观遗传学.
- 基因编辑 基因编辑
背景情况:
- 基于CRISPR的技术彻底改变了可编程基因操纵.
- 表观遗传编辑提供了针对性的基因扰动,而不会改变DNA序列.
- 在CRISPRoff中,建立了DNA甲基化和抑制基因素修饰.
研究的目的:
- 描述提供CRISPR的表观遗传编辑器的协议.
- 为评估CRISPRoff-mediated基因沉默提供指导.
- 突出在基因扰乱研究中使用CRISPRoff的考虑因素.
主要方法:
- 通过等离子体DNA转染和mRNA的CRISPRoff传递.
- 在转化的人类细胞系和原发性免疫细胞中应用.
- 对目标基因沉默和遗传性的评估.
主要成果:
- CRISPRoff诱导了目标基因的稳定,可遗传的转录抑制.
- 协议在各种类型的人体细胞中有效.
- 成功建立了DNA甲基化和压制性基因素标记.
结论:
- CRISPRoff提供了一种可编程,可遗传的基因沉默的强大方法.
- 描述的协议广泛适用于基于CRISPR的表观遗传编辑.
- 这项技术有助于精确控制基因表达.
