通过在传递过程中过度表达 lef5 基因来增强 AcMNPV 中外源蛋白稳定性

科学领域:

• 生物技术是生物技术.
• 分子生物学分子生物学
• 病毒学 病毒学

背景情况:

• 细菌病毒表达系统对于产生外源蛋白质至关重要.
• 昆虫细胞中的连续通道可以导致有缺陷的病毒和减少蛋白质表达,限制应用.
• 来自其他baculoviruses的晚表达因子5 (lef5) 可能会增强Autographa californica多重核聚合体病毒 (AcMNPV) 的基因稳定性.

研究的目的:

• 调查 lef5 过度表达对 AcMNPV 外源基因和蛋白质表达稳定性的影响.
• 评估不同促进剂对 lef5-介导表达稳定性的影响.
• 评估 lef5 对于表达复杂蛋白质,如肠道病毒 71 病毒样粒子 (EV71-VLP) 的实用性.

主要方法:

• 改造重组AcMNPV菌株以表达增强的绿色光蛋白 (eGFP) 和EV71病毒样颗粒 (EV71-VLPs).
• 同表达的EV71 P1和3CD蛋白.
• 在Sf9细胞中的串行通道期间,研究了各种促进剂下的lef5过度表达.

主要成果:

• lef5过度表达显著改善了eGFP和EV71-P1基因和蛋白质表达在串行通道期间的稳定性.
• 驱动lef5过度表达的op166促进体特别有效地提高了像EV71-VLP这样的复杂蛋白质的表达稳定性.
• 促体选择影响 lef5 在稳定基因表达中的有效性.

结论:

• 过度表达 lef5 对于保持稳定的外源基因表达在 baculovirus 系统中至关重要.
• lef5过度表达增强了复杂蛋白质的产生,包括病毒样颗粒.
• 战略性促进体选择可以优化对挑战性蛋白质标的 lef5-介导表达稳定性.