一个简化的小鼠DRG固定,处理和F4/80免疫组织化学的综合协议:克服共同的挑战
Nicolette Tay1, Ammar Alshammari2, Simranpreet Kaur3
1School of Pharmacy and Pharmaceutical Sciences, The University of Queensland, Woolloongabba, QLD, Australia.
Journal of neuroscience methods
|March 25, 2025
概括
我们优化了一种用于修复和处理小鼠背部根 (DRGs) 的方法,用于免疫组织化学 (IHC). 这种技术可以保持组织完整性和细胞形态,从而更好地分析神经病痛机制.
科学领域:
- 神经科学是一个神经科学.
- 免疫学 免疫学 免疫学
- 组织病理学 组织病理学
背景情况:
- 背部根腺 (DRG) 在神经病痛中起着至关重要的作用.
- 免疫组织化学 (IHC) 可视化了DRG中的免疫细胞.
- 由于大小和位置,对IHC的DRG隔离具有挑战性.
研究的目的:
- 优化鼠标DRG的固定,收获,加工和IHC染色.
- 使用F4/80,一个单细胞-巨细胞标记物,进行分析.
- 确保组织完整性和与组织病理学的兼容性.
主要方法:
- 在10%的中性缓冲甲中固定整个小鼠脊柱.
- 在24小时固定后DRG隔离.
- 9小时处理和蛋白酶K抗原检索.
主要成果:
- 优化的沉浸固定保存了细胞形态和抗原性.
- 取得了高质量的组织学结果.
- 这种方法是非侵入性的,可以缩短固定时间.
结论:
- 该协议提供了高质量的组织学结果.
- 它可以与基于 perfusion 的技术相提并论.
- 一个分级系统有助于选择最佳的实验条件.
