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Updated: May 20, 2025
06:52
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Published on: September 13, 2022
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使用斑马鱼手2Cre和CreERT2重组酶CRISPR敲入式进行血统标记
Zhitao Ming1, Fang Liu1, Hannah R Moran2
1Department of Genetics, Development and Cell Biology, Iowa State University, Ames, Iowa, USA.
概括
新的CRISPR-Cas9技术可以创建斑马鱼手2 Cre和CreERT2驱动器,用于精确的血统追踪. 这些工具揭示了手2祖先对包括血管在内的各种胚胎和幼虫组织的贡献.
科学领域:
- 发展生物学 发展生物学
- 遗传学 遗传学 是一个
- 斑马鱼模型 斑马鱼模型
背景情况:
- 克里斯普尔-Cas9敲进技术促进了内源的CRE重组酶驱动器生成.
- 这使得谱系追踪和细胞类型特定的基因研究成为可能.
- 内生斑马鱼手2 Cre和CreERT2驱动程序是使用GeneWeld CRISPR-Cas9精确目标集成生成的.
研究的目的:
- 为了生成和表征内生斑马鱼手2 Cre和CreERT2驱动器.
- 为了利用这些驱动器在胚胎生成和幼虫器官生成期间追踪血统.
- 调查手2表达原始体对各种组织的贡献.
主要方法:
- 克里斯普尔-Cas9敲进技术 (GeneWeld) 用于产生内源驱动器.
- 交叉的手2-2A-cre和手2-2A-creERT2与基于loxP的交换机记者进行敲击.
- 在特定的胚胎和幼虫阶段对CreERT2活动的时间诱导.
主要成果:
- 介皮和神经衍生系的广泛标记,包括分支弧,心脏,肝脏,肠道和肠道神经元.
- 在静脉血管中观察到的新手2血统追踪模式.
- 时间分析揭示了手2祖先对静脉和肠道血管系统 (24-48hpf) 的贡献以及受限制的幼虫系.
结论:
- 从侧板介质皮和外皮的 hand2 的祖先有助于不同的胚胎血统.
- 手2表达细胞在晚期幼虫阶段显示受限的血统贡献.
- 开发的内生hand2 Cre和CreERT2驱动器是研究斑马鱼发育中的hand2谱系的宝贵工具.
