干细胞培养条件会影响体外分化潜力和小鼠胃化物形成

科学领域:

• 发展生物学 发展生物学
• 干细胞生物学 干细胞生物学
• 表观遗传学 在表观遗传学中,表观遗传学是指表观遗传学.

背景情况:

• 胃体,自组织结构来源于小鼠胚胎干细胞 (mESCs),模拟早期发育,但表现出实验性的变异性.
• 目前的协议在形态,延长效率和细胞类型组成方面缺乏一致性.

研究的目的:

• 调查调节mESC多能状态是否可以增强胃类形成的一致性和可重复性.
• 为了确定特定的培养前条件,从而导致更均的胃体发育.

主要方法:

• 在三条mESC线上使用ESLIF和2i介质的不同间隔调制mESC多能性.
• 通过显微镜分析胃形态.
• RNA测序 (RNA-seq) 来评估多能性状态的变化.
• 全基因组DNA甲基化和H3K27me3分布分析.
• 评估胃类细胞类型的组成.

主要成果:

• 培养前的条件显著影响了胃形态,面积比和可重现性.
• 基于媒体治疗的RNA-seq揭示了不同的细胞状态和表观遗传调节者的差异表达.
• 表观遗传学分析显示了DNA甲基化和H3K27me3的条件特异性差异,特别是在发育基因促进者附近.
• 与2i-ESLIF预培养的mESCs相比,与ESLIF单独的对照组相比,产生了更一致的胃质,具有增强的间皮贡献.

结论:

• 通过定义的培养前介质优化mESC多能性状态对于改善胃类形成的一致性至关重要.
• 调节多能性和表观遗传状态可以更好地控制胃体发育过程中的细胞分化.
• 这项研究为研究早期人类发育的更可复制的胃类型模型提供了基础.