一个高通量查策略,用于生产Bacillus subtilis生产Menaquinone-7基于光激活细胞分类
Lina Yang1, Can Tang1, Yan Cui1
1School of Agriculture and Biology, Bor S. Luh Food Safety Research Center, Shanghai Jiao Tong University, Shanghai 200240, China.
Microorganisms
|March 27, 2025
概括
研究人员开发了一种高通量选方法,以提高Bacillus subtilis中的menaquinone-7 (MK-7) 产量. 这项新策略确定了一种突变菌株,其MK-7产量增加了85.65%,为改进的发酵过程铺平了道路.
科学领域:
- 微生物学 微生物学
- 生物技术是生物技术.
- 生物化学 生物化学
背景情况:
- menaquinone-7 (MK-7) 是一种具有显著生物活性的重要化合物.
- 细菌细菌是MK-7发酵的主要微生物.
- 限定的菌株多样性阻碍了高产MK-7生产者的有效选.
研究的目的:
- 开发一种高通量查 (HTS) 方法,用于识别具有增强MK-7产量的细菌菌株.
- 为了利用MK-7与查的跨膜潜力之间的关系.
- 为了提高MK-7发酵菌株开发的效率.
主要方法:
- 开发了一种使用Rhodamine 123测量细胞内MK-7水平的HTS策略,通过跨膜潜力测量.
- 优化了染色协议,并将光激活细胞分类与HPLC分析结合起来.
- 将HTS方法应用于由大气室温等离子体突变生成的突变库.
主要成果:
- 建立了一个强大的HTS协议,在光强度和MK-7含量之间具有强烈的线性相关性 (R2 = 0.9646).
- 确定了一种优异突变菌株,AR03-27,其MK-7产量比母菌株增加85.65%.
- 在表现最好的突变体中发现了与膜运输相关基因的突变.
结论:
- 开发的HTS方法是有效的快速识别高产MK-7生产菌株.
- 膜运输基因的突变是进一步增强MK-7生产的潜在目标.
- 这种方法显著加速了用于生物技术应用的改进微生物菌株的开发.
