惯性微流体学使得从超低血量样本中分离出的中性粒细胞的功能分析成为可能

科学领域:

• 生物医学工程 生物医学工程
• 免疫学 免疫学 免疫学
• 微流体学 微流体学

背景情况:

• 免疫细胞功能监测至关重要,但需要大量血液的需求阻碍了这一点.
• 传统的白细胞计数缺乏直接免疫细胞分析的功能相关性.
• 现有的分离免疫细胞的方法往往需要大量的样本,限制了应用.

研究的目的:

• 开发一种节省样品的微流体平台,用于从最小的血液体积中分离白细胞.
• 评估使用开发的平台分离的白细胞的纯度,恢复和活力.
• 为下游免疫检测验证分离中性粒细胞的功能完整性.

主要方法:

• 开发一种惯性微流体平台,能够处理10μL的血液.
• 隔离和净化白细胞,专注于中性粒细胞.
• 使用诸如细胞化,ROS产量和NETosis等测定方法对分离的中性粒细胞进行功能评估.
• 测试平台与标准实验室工作流程 (流细胞计,细胞培养) 的兼容性.
• 用各种样本类型 (老鼠血液,人类毛细血管血液) 展示平台的多功能性.

主要成果:

• 获得白细胞隔离的纯度约为80%,器件内恢复率>90%,活力>95%.
• 隔离的中性粒细胞保持了原生表型,CD62L和CD11b表达没有显著变化.
• 功能性测试证实,分离的中性粒细胞保留了它们的细胞能力,ROS生产和NETosis能力.
• 从小鼠和人类毛细血管血液样本中成功分离白细胞,证明了广泛的适用性.

结论:

• 开发的微流体平台有效地将功能性白细胞从小血量 (10μL) 中隔离出来.
• 该平台保留了中性粒细胞的活力和功能,使其适合敏感的免疫监测.
• 这项技术为研究和临床环境中的免疫细胞分析提供了多功能解决方案,特别是当样本数量有限时.