通过表面涂层扩展脂肪细胞的三维培养
Sheetal Chowdhury1, Komal Beeton2, Zacchaeus Wallace1
1Department of Biomedical Materials Science, University of Mississippi Medical Center, 2500 N State Street, Jackson, MS 39216, USA.
Bioengineering (Basel, Switzerland)
|March 28, 2025
概括
研究人员改进了用于研究肥胖症的3D细胞培养模型,通过将氨酸-甘氨酸-酸 (RGD) 添加到类似弹性质的多 (ELP) -聚乙烯胺 (PEI) 涂层中. 这在媒介变化期间增强了球形稳定性,这对于长期脂肪衍生干细胞培养至关重要.
科学领域:
- 生物材料科学 生物材料科学
- 干细胞生物学 干细胞生物学
- 组织工程是组织工程.
背景情况:
- 开发模拟渐进性脂肪的体外模型需要长期培养3D球形中的脂肪衍生干细胞 (ASC),以逐渐积累脂肪.
- 弹性类聚 (ELP) 和聚乙烯胺 (PEI) 已被用于3D hASC球形培养和脂肪细胞分化5周.
研究的目的:
- 通过将ELP与氨酸-甘氨酸-酸 (RGD) 残留物融合,提高3DASC培养的球形粘附特性.
- 通过使用ELP-PEI涂层,研究在ELP的C端或N端加入RGD对球形形成和保留的影响.
主要方法:
- 在大肠杆菌中产生ELP-RGD合物 (ELP-(RGD) 3和 (RGD) 3-ELP),并与PEI合.
- 描述涉及SDS凝电泳,FTIR光谱和度测量以确认结合和评估属性.
- 球状体的形成,大小和保留经过重复的介质变化后使用DNA测试来评估.
主要成果:
- 证实ELP-RGD结合没有显著改变ELP的分子量,功能组或过渡温度.
- ELP-PEI涂层形成的球形 (61.8微米) 比ELP-(RGD) 3-PEI (56.6微米) 和 (RGD) 3-ELP-PEI (53.4微米) 涂层稍大一些.
- 不同于ELP-PEI涂层,ELP-(RGD) 3-PEI和 (RGD) 3-ELP-PEI涂层表现出优异的球形保留,在20次媒介变化后没有显著的DNA损失.
结论:
- 在ELP-PEI涂层中整合RGD不会阻碍初始球形形成.
- 经RGD修改的ELP-PEI涂层显著提高了在动态培养条件下3DASC球体的稳定性和保留性.
- 这些改进的涂层为长期的脂肪和脂肪组织发育体外研究提供了更强大的平台.
