基于滴滴的细胞毒性试验,以评估单细胞水平的化学抗原受体T细胞
Zelvera Ismetova Usheva1, David Leander Petersen2, Torben Barington1
1Centre for Cellular Immunotherapy of Haematological Cancer Odense (CITCO), Department of Clinical Immunology, Odense University Hospital.
Journal of visualized experiments : JoVE
|March 31, 2025
概括
这项研究引入了一种基于滴滴的新型试验,用于评估仿真抗原受体 (CAR) T 细胞治疗. 该方法可以对单细胞分析CAR T细胞杀死效率和功能异质性.
科学领域:
- 免疫学 免疫学 免疫学
- 细胞生物学 细胞生物学
- 生物技术是生物技术.
背景情况:
- 评估基于T细胞的治疗方法 (如CAR T细胞) 的细胞毒性潜力对于临床应用至关重要.
- 传统的批量测试缺乏能够捕捉CAR T细胞种群中的功能异质性的分辨率.
研究的目的:
- 开发一种高通量,单细胞的方法来评估CAR T细胞细胞毒性.
- 为了使效应分子释放和细胞死亡的双重量化.
主要方法:
- 一种基于双乳液滴滴的微流体系统,用于与单个点细胞 (CD19+JeKo-1) 共同封装单效应性CAR T细胞.
- 使用试剂可用于可视化Granzyme B分泌和化 (PI) 染色细胞死亡.
- 采用标准流量细胞测量来分析滴体内的功能多样性.
主要成果:
- 证明成功生成含有单个CAR-T和点细胞的液滴.
- 展示了测试CD19特异性CAR T细胞杀死功能的异质性和时间动力学的能力.
- 在单细胞水平上验证了对效应分子和目标细胞死亡的双重量化.
结论:
- 开发的以滴滴为基础的测试提供了有关CAR T细胞功能异质性和细胞毒性潜力的详细见解.
- 这种方法适用于各种T细胞类型,细胞毒性免疫细胞和其他效应器功能,如细胞因子分泌.
- 为采用细胞疗法进行临床前评估和优化提供了一种有价值的工具.
