对火Thermobia domestica的高效转基因系统使用hyPBase和G₀创始人预选

科学领域:

• 昆虫遗传学 昆虫遗传学
• 发育生物学是发展生物学.
• 分子进化是分子进化的过程.

背景情况:

• 火 (Thermobia domestica) 是一种有价值的尾虫模型昆虫,因为它的繁殖速度很快,繁殖起来很容易.
• 之前的工作建立了胚胎注射和CRISPR/Cas9基因组编辑方法,用于Thermobia domestica.

研究的目的:

• 在Thermobia domestica中建立一个高效的转基因系统,使用超活跃的piggyBac转基因酶 (hyPBase).
• 扩大基因操纵技术,在这个模型生物体中进行先进的研究.

主要方法:

• 用hyPBase mRNA和GFP记者等离子体注入Thermobia domestica的胚胎.
• 使用眼睛增强剂用于特定的GFP表达.
• 评估G0和G1代的转基因效率和生殖系传播率.

主要成果:

• 在Thermobia domestica.中实现了第一个成功的转基因.
• 在5.7%的G0个体中观察到眼睛特异性的GFP表达.
• 在GFP阳性G0创始人中,与GFP阴性创始人 (19.0%) 相比,在GFP阳性G0创始人中表现出显著更高的生殖系传播率 (53.3%).
• 证实了来自GFP阳性G0创始人的G1转基因后代比例较高 (20.0%).
• 通过hyPBase插入多个转基因与转化效率的提高相关.

结论:

• 开发的hyPBase介导的转基因系统对Thermobia domestica.非常有效.
• G0创始人的GFP表达精确地预测了转基因G1后代.
• 这个系统为研究基本的生物过程提供了必不可少的遗传工具包,例如Thermobia domestica的翅膀进化和变形.