使用循环介导的异热放大与基于纳米粒子的侧流生物传感器相结合,对绵羊Theileria物种进行差异检测
Haohan Zhu1, Shuaiyang Zhao1, Jin Luo1
1State Key Laboratory for Animal Disease Control and Prevention, Key Laboratory of Veterinary Parasitology of Gansu Province, Lanzhou Veterinary Research Institute, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Xujiaping 1, Lanzhou, Gansu 730046, PR China.
Veterinary parasitology
|April 3, 2025
概括
通过循环介导的同热放大 (LAMP) 和基于纳米粒子的侧流生物传感器 (LFB) 开发了一种针对绵羊乳病的新快速检测技术. 这种方法可以在85分钟内准确地识别出中国三种导致绵羊乳病的Theileria物种.
科学领域:
- 兽医寄生虫学 兽医寄生虫学
- 分子诊断学 分子诊断学
- 传播疾病 传播疾病
背景情况:
- Ovine theileriosis 是一种由传播的重要原生动物疾病,由中国的三个Theileria物种引起:T. luwenshuni,T. uilenbergi和T. ovis. ovis.
- 准确和快速的诊断方法对于管理绵羊病爆发至关重要.
研究的目的:
- 建立新的检测技术,同时识别由T. luwenshuni,T. uilenbergi和T. ovis引起的感染.
- 开发一种快速,灵敏和特定的诊断试验来检测绵羊病.
主要方法:
- 开发了三种循环介导的同热放大 (LAMP) 初始集,针对三个Theileria物种的28SrRNA基因.
- 优化LAMP反应条件,并与基于纳米粒子的侧流生物传感器 (LFB) 集成,用于LAMP-LFB综合测定.
- 对其他Theileria,Babesia和Anaplasma物种进行测试特异性的评估,并确定检测极限.
主要成果:
- 在LAMP-LFB测定成功和具体检测T. luwenshuni,T. uilenbergi和T. ovis没有交叉反应.
- 该试验显示了高灵敏度,检测极限低至3.05 × 10^1副本/μL的T. ovis.
- 与传统PCR的整体匹配率很高,为T. luwenshuni和T. uilenbergi达到96.67%,为T. ovis. uilenbergi达到93.33%.
- 整个检测过程,从DNA提取到结果读取,在85分钟内完成.
结论:
- 一种快速,简单,灵敏和特定的LAMP-LFB试验成功地开发出来,用于T. luwenshuni,T. uilenbergi和T. ovis的差异诊断.
- 这种测试为在小反动物中及时和准确诊断绵羊病提供了有价值的工具.
