快速查和鉴定参与细菌细胞外膜囊泡生产的基因,使用曲率感应

科学领域:

• 微生物学 微生物学
• 分子生物学分子生物学
• 生物技术是生物技术.

背景情况:

• 细菌分泌细胞外膜囊泡 (EMV),具有重要的生理功能和生物技术潜力.
• 背后的EMV生物发生的分子机制尚未完全理解.
• 之前开发的NBD标记 (nFAAV5-NBD) 可以感知脂质双层曲率,并选择性地与EMV结合.

研究的目的:

• 通过全基因组查方法,识别参与细菌细胞外膜囊泡 (EMV) 生产的基因.
• 为了阐明EMV生物发生的分子基础在*Shewanella vesiculosa* HM13.
• 为潜在的生物技术应用开发高和低流动突变物.

主要方法:

• 使用感应曲率的nFAAV5-NBD,对*Shewanella vesiculosa* HM13的转子突变体进行全基因组选.
• 对转子体插入部位的分析,以确定与改变EMV产生相关的基因.
• 向基因破坏,以验证已识别的基因在EMV生物发生中的作用.

主要成果:

• 鉴定出16个与超脉流相关的基因和6个与低脉流相关的基因.
• 编码二二基因酶,谷氨酸合成酶,LapG蛋白酶等基因的破坏导致了EMV的过度生产.
• 对基酸合成酶,d-hexose-6-phosphate epimerase和其他基因的破坏降低了EMV的产生.

结论:

• 这项研究表明,nFAAV5-NBD对EMV生产突变物的有效查具有实用性.
• 提供了对调节细菌EMV生物发生的遗传因素的新见解.
• 产生了对基于EMV的生物技术应用有价值的超流变异物.