降低适用于冷保存的Jurkat细胞配方中的二甲基硫氧化物含量

科学领域:

• 生物技术是生物技术.
• 细胞生物学 细胞生物学
• 制药科学 制药科学

背景情况:

• 基于细胞的药物 (CBMP) 通常使用高度二甲基硫氧化物 (Me2SO) (>10%) 的冷保存.
• 虽然Me2SO对冷保护有效,但在环境温度下可能导致细胞损伤和患者副作用.
• 减少Me2SO对于更安全,更有效的基于细胞的疗法至关重要.

研究的目的:

• 开发用于减少或不含Me2SO.SO的Jurkat细胞的新型冷保存配方.
• 为了确定可替代的辅助剂,以保持高的解后细胞活力.
• 为了评估冷保存细胞在 -80°C,没有液的存储的可行性.

主要方法:

• 使用实验设计 (DoE) 方法选了七种辅助物质:Me2SO,三糖,醇,素,乙烯酸,乙烯酸,波洛克萨 188 (P188) 和聚乙烯酸罗利 40 (PVP).
• 配方被评估为解后的生存能力和玻璃过渡温度 (Tg).
• 稳定性研究在三个月内在-145°C,-80°C和-40°C进行,与基准解决方案进行比较.

主要成果:

• 甲基二硫化物 (Me2SO) 是影响尤卡特细胞活力的最重要因素,较高度与更好的生存相关.
• 大多数开发的配方在-145°C和-80°C显示出可比的可行性,但在-40°C则没有.
• 基准配方略高于测试配方;然而,有希望的候选者如三和PVP组合被确定为减少Me2SO冷保存.
• 在解后的24小时后,细胞活力显著下降,这表明正在进行的冷解损伤.

结论:

• 醇和PVP显示出作为冷保护辅助剂的潜力,可降低Me2SO度以保护Jurkat细胞.
• 冷保存配方可以优化,以允许在-80°C储存,从而消除了对液的需求.
• 进一步研究没有Me2SO的配方和了解解后恢复机制是有必要的,以推进基于细胞的疗法.