使用图像流细胞测量对后遗传性男性生殖细胞进行高通量分析
Maria Eugenia Teves1, Eduardo R S Roldan2,3, Clara Agudo-Rios2,3
1Department of Obstetrics and Gynecology, Virginia Commonwealth University, Richmond, VA, USA. maria.teves@vcuhealth.org.
Methods in molecular biology (Clifton, N.J.)
|April 9, 2025
概括
图像流细胞计 (IFC) 提供了一种新方法,通过追踪蛋白质胺1 (PRM1) 核转移来分析精子分化. 这种技术为男性生育研究提供了可靠的定量数据.
科学领域:
- 生殖生物学 生殖生物学
- 细胞生物学 细胞生物学
- 生物技术是生物技术.
背景情况:
- 丸细胞异质性需要精确的方法来研究男性生殖细胞生物学.
- 图像流细胞计 (IFC) 是分析异质细胞群的强大工具.
- 鉴别精子分化对于了解男性生育能力至关重要.
研究的目的:
- 开发和验证基于IFC的方法来分析精子分化.
- 在精子生成过程中量化质氨酸1 (PRM1) 的核转位.
- 为了能够对男性生殖细胞发育进行强有力的定量分析.
主要方法:
- 优化了组织消化协议,用于IFC分析生殖细胞.
- 染色生殖细胞悬浮物用于PRM1和核DNA.
- 使用核面具进行图像分析,以分类精子体阶段和相似度得分来量化PRM1转位.
主要成果:
- 通过IFC成功识别了不同的精子体阶段.
- 用单细胞分辨率量化了PRM1的核转移.
- 证明了检测PRM1亚细胞分布的微妙变化的能力.
结论:
- 开发的IFC协议准确地描述了精子体阶段和PRM1核转位.
- 该方法为男性生育率研究提供客观,定量数据.
- 该协议可用于分析其他蛋白质转位和物种.
