在小体积尿液中的快速分析:优化LC-MS/MS对自由葡萄皮质激素的优化

科学领域:

• 生物化学 生化学
• 分析化学 分析化学
• 内分泌学 在内分泌学.

背景情况:

• 葡萄糖皮质醇是应激反应和疾病的关键生物标志物,调节新陈代谢和免疫力.
• 当前的分析方法通常需要大量的样本,限制了大规模研究.
• 缩小样本要求对于推动这些领域的研究至关重要.

研究的目的:

• 开发和验证一个缩小液态染色学-并联质谱法 (LC-MS/MS) 方法来分析尿路皮质醇和皮质素.
• 为了减少所需的尿样体积用于葡萄糖皮质激素分析,同时保持准确性和可靠性.

主要方法:

• 修改了现有的LC-MS/MS方法,将尿样体积从100μL减少到20μL.
• 作为内部标准和调整的校准标准 (1/5稀释) 纳入了cortisone-d8.
• 验证的线性,量化的下限 (LLOQ),矩阵效应,回收,准确性和可重复性.

主要成果:

• 实现了良好的线性 (2-200 ng/mL),LLOQ低于2 ng/mL.
• 对矩阵因子观察到可接受的变化系数 (<15%).
• 缩小规模的方法表现出良好的回收,准确性,可重复性和与原始方法的一致性,其中有一些矩阵效应变化.

结论:

• 缩小规模的LC-MS/MS方法有效地使用显著减少的样本体积分析尿皮质醇和皮质.
• 这种优化的方法促进了更大的队列研究,并加速了对应激反应和相关疾病的研究.
• 该方法显示了在各种生理和病理条件下推进葡萄糖皮质类药物的研究的潜力.