开发一种新的嵌套RT-LAMP测试方法,用于快速准确地诊断2019年冠状病毒疾病
Hadi Mirzaei1, Neda Sepahi2, Abdolmajid Ghasemian2
1Department of Medical Genetics, School of Medicine, Zabol University of Medical Sciences, Zabol, Iran.
概括
一种新的循环介导同热放大 (LAMP) 试验为RT-PCR提供了一种灵敏,具有成本效益的COVID-19诊断替代方案. 这种新的方法可以在2小时内准确检测无症状和轻度症状病例.
科学领域:
- 分子生物学分子生物学
- 病毒学 病毒学
- 诊断检测试验 诊断检测试验
背景情况:
- 新冠病毒病2019 (COVID-19) 构成了全球重大公共卫生威胁.
- 目前的诊断方法如RT-PCR在成本和可访问性方面存在局限性.
- 循环介导同热放大 (LAMP) 为快速诊断提供了潜在的优势.
研究的目的:
- 开发和评估一种用于检测COVID-19的新型,高度敏感的嵌套RT-LAMP试验.
- 将新试验的性能与标准RT-LAMP和RT-PCR进行比较.
- 评估一个单步嵌套RT-LAMP试验的可行性,没有RNA提取.
主要方法:
- 设计针对SARS-CoV-2的N基因的新型原料套件.
- 对嵌套RT-LAMP,标准LAMP和RT-PCR的检测极限 (LOD) 的确定.
- 使用200个已确认的COVID-19阳性和阴性样本验证试验的验证.
- 对直接样本测试的一步嵌套RT-LAMP协议的评估.
主要成果:
- 与RT-PCR (15副本/μL) 相比,嵌套RT-LAMP试验显示出5个副本/μL的优异LOD.
- 这两种LAMP测定都实现了100%的灵敏度和98%的特异性.
- 一步嵌套RT-LAMP试验显示了94%的灵敏度和97%的特异性.
结论:
- 开发的嵌套RT-LAMP试验是一种敏感,特定和具有成本效益的替代RT-PCR用于COVID-19诊断.
- 这种测试可以准确检测无症状或轻度症状的个体.
- 该测试提供了快速 (2小时) 的结果,可以用肉眼检测到,从而提高了可访问性.
