对Trichoderma afroharzianum进行定量SYBR绿色实时PCR的开发,Trichoderma afroharzianum是玉米耳朵腐烂的致病原体

科学领域:

• 植物病理学 植物病理学
• 分子诊断学 分子诊断学
• 农业微生物学 农业微生物学

背景情况:

• 特里科德玛 (Trichoderma afroharzianum) 是一种新兴的病原体,导致玉米 (Zea mays L.) 耳朵腐烂.
• 最近的发现表明Trichoderma spp.的感染率很高. 在意大利北部的玉米种子批发中.
• 这种病原体对玉米生产和种子质量构成重大威胁.

研究的目的:

• 开发和验证一种敏感和特定的分子测试,用于检测玉米种子中的Trichoderma afroharzianum.
• 量化T. afroharzianum在受感染的种子批发中的流行率.
• 为早期检测和种子认证提供一个工具.

主要方法:

• 开发针对转化延长因子1α基因的特定物种原料.
• 建立一个SYBR绿色定量PCR (qPCR) 试验.
• 根据EPO标准PM 7/98指南验证qPCR测定,包括灵敏度,特异性,可重复性和可重复性测试.

主要成果:

• 开发的SYBR Green qPCR试验表现出高特异性,只有目标DNA产生正放大.
• 该试验实现了低检测极限 (50 fg的T. afroharzianum DNA),即使在玉米种子DNA的存在下也是如此.
• 验证证实了该试验在无症状玉米种子中检测T. afroharzianum的可靠性.

结论:

• 绿色的SYBR qPCR试验是一种有价值的工具,用于在玉米种子中特定和敏感地检测和量化Trichoderma afroharzianum.
• 这种方法支持早期疾病检测,并增强种子认证过程.
• 通过可靠的诊断工具,可以提高这种新出现的玉米病原体的有效管理.