桃糖糖转移酶PpUGT78B的活性注释是基于工程细菌抗生素生物合成的

科学领域:

• 植物生物化学和分子生物学
• 代谢工程是代谢工程.
• 果实质量研究 果实质量研究

背景情况:

• 通过Flavonoid glycosyltransferases (UFGT) 来糖化安托胺的糖化增强了安托胺的稳定性,水果的颜色和生物可用性.
• 了解桃子UFGT (PpUGT78B) 功能对于改善植物中安托素的产生至关重要.

研究的目的:

• 使用工程细菌系统阐明桃子UFGT (PpUGT78B) 的功能和结构.
• 为了确定PpUGT78B中关键的残留物,负责糖化活性.
• 为了研究自然突变对PpUGT78B活动的影响.

主要方法:

• 构建一个工程细菌系统,同时表达安东基亚尼丁合成酶 (ANS) 和桃子UFGT (PpUGT78B).
• 使用 (+) - 甲基素前体生产丁-3-O-糖化物 (C3G).
• 分子建模,有针对性的突变发生,以及对桃子基因组重新测序数据的分析.

主要成果:

• 细菌中ANS和UFGT的同时表达增加了15-20%的C3G产量.
• 特定的残留物 (F210,L148,Q393,G391,H230) 被确定为PpUGT78B糖化活性的关键,突变减少或取消功能.
• 在F203和S29的突变增强了催化活性.
• 在桃子品种中发现的自然突变 (E82D,V276F) 降低了PpUGT78B的活性.

结论:

• 工程细菌系统是有效的研究安托氨酸生物合成.
• 获得了对PpUGT78B的关键功能和结构见解,进步了对安托氨酸糖化酶的理解.
• 鉴定的突变为未来的作物改进战略提供了目标.